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FAQ

[vc_row row_type=”row” use_row_as_full_screen_section=”no” type=”full_width” angled_section=”no” text_align=”left” background_image_as_pattern=”without_pattern” css_animation=”” el_class=”tab-style tab_1200″ el_id=”tab0″][vc_column width=”1/6″ el_class=”active”][vc_column_text el_class=”tab-0″]일반[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-1″]ÄKTA[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-2″]Biacore[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-3″]AI 680[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-4″]Column & Resin[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-5″]소모품[/vc_column_text][/vc_column][/vc_row][vc_row row_type=”row” use_row_as_full_screen_section=”no” type=”full_width” angled_section=”no” text_align=”left” background_image_as_pattern=”without_pattern” css_animation=”” el_class=”popup_wrp contant_wrp_100 faq_wrp”][vc_column][ultimate_modal modal_title=”1. GE에서 제공하는 Online Tool은 어떤 것이 있나요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”1GE에서 제공하는 Online Tool은 어떤 것이 있나요?” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]

실험에 유용한 많은 tool을 Web과 Mobile Apps으로 제공하고 있습니다.

아래 링크에서 많은 정보를 얻으시길 바랍니다.

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[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”2. 유용한 Mobile Apps을 소개해 주세요.” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”2유용한 Mobile Apps을 소개해 주세요.” txt_color=”#555555″ modal_size=”medium” modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up”]

Chromatography 를 위한 [Purify], [ÄKTA accessories], Lab filtration을 위한 [Whatman Filters], 그외에 [Percoll Calculator], [Oil Calculator] 등이 있습니다.

*아래 아이콘을 클릭하여 확인 하실 수 있습니다.

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ÄKTA Accessories

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Whatman Filters

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[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”3. Regulatory Support 문서는 어떻게 받을 수 있나요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”3Regulatory Support 문서는 어떻게 받을 수 있나요?” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up”]GE의 Regulatory Support Web Application Website에서 회원가입 하시면 원하시는 Regulatory Support File (RSF)을 직접 찾아서 pdf로 받으실 수 있을 뿐 아니라, regulatory support document (RSD)가 update 되거나, 새로운 Change Control Notification (CCN)이 publish 되면 이메일로 안내를 받으실 수 있습니다.

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-> 관련 브로셔 & Data Files[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”4. Regulatory Support Web Application은 무엇인가요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”4Regulatory Support Web Application은 무엇인가요?” txt_color=”#555555″ modal_size=”block” modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up”]GE Healthcare Life Sciences는 Regulated Environments에서 GE 제품을 활용할 수 있도록 regulatory support document (RSD)와 Change Control Notification (CCN)의 Regulatory Support를 Web상에서 고객에게 직접 제공합니다.

 
Regulatory Support Document (RSD)
Change Control Notification (CCN)
소개규제기관에 제공할 수 있는 process development, validation, SOP, QC, 그리고 임상과 마케팅을 위한 자료들고객이 생산하는 제품, 공정, 문서, 또는 과정에 잠재적인 영향을 미칠 수 있는 변화에 대한 정보를 제공하는 서비스
종류1) Regulatory Support Files (RSF) -> 제품의 기능, 안정성, extractable compounds, 분석방법 등을 수록한 자료1) BioProcess 제품 -> Chromatography resin/장비/columns, RTP, WAVE Bioreactors, Process-scale filtration
2) Validation Support File (VSF) -> UNICORN software의 version에 따른 validation 자료2) Biacore 제품 -> Biacore 장비/software/소모품
3) Validation Guide (VG) -> Single-use products (Process-scale filtration equipment, Cellbag bioreactors)과 ReadyToProcess products의 validation guide
[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”5. Regulatory Support web Application을 어떻게 사용할 수 있나요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”5Regulatory Support web Application을 어떻게 사용할 수 있나요?” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up”]Web에서 회원가입을 하시면 GE가 제공하는 각종 RSD와 CCN정보를 받으실 수 있습니다.

회원가입 방법은 아래 링크에서 확인하실 수 있습니다.

-> Regulatory Support web Application 가입방법[/ultimate_modal][/vc_column][/vc_row][vc_row row_type=”row” use_row_as_full_screen_section=”no” type=”full_width” angled_section=”no” text_align=”left” background_image_as_pattern=”without_pattern” css_animation=”” el_class=”tab-style tab_1200″ el_id=”tab1″][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-0″]일반[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″ el_class=”active”][vc_column_text el_class=”tab-1″]ÄKTA[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-2″]Biacore[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-3″]AI 680[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-4″]Column & Resin[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-5″]소모품[/vc_column_text][/vc_column][/vc_row][vc_row row_type=”row” use_row_as_full_screen_section=”no” type=”full_width” angled_section=”no” text_align=”left” background_image_as_pattern=”without_pattern” css_animation=”” el_class=”popup_wrp contant_wrp_100 faq_wrp”][vc_column][ultimate_modal modal_title=”1. ÄKTA 시스템 사용 시 Purging 하는 이유, Purging 방법에 대해 설명해 주세요.” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”1ÄKTA 시스템 사용 시 purging 하는 이유, purging 방법에 대해 설명해 주세요.” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]

Purging을 하는 이유

Air bubble이 생기게 되면 정확한 flow rate이 생기지 않게 되며, 샘플 peak 가 Air bubble peak에 묻혀서 단백질 정제를 하기가 힘들어 지고, 심한 경우 air 가 많을 시에는 Pump 의 작동이 멈추어 집니다.

 

Purging 방법에 대해 설명하겠습니다.

Air bubble 은 시린지를 사용하여 Pump의 purge valve 를 통해서 제거를 합니다. 이 과정을 purging이라 합니다. A1, A2, B1, B2 의 4개의 인렛 튜핑의 퍼지 조작을 예를 들어 설명하겠습니다. (아래 그림을 참조해 주십시오.)

① 펌프 A 좌측의 펌프헤드의 퍼지밸브에 시린지를 연결하신 후에, 반시계 방향으로 돌려 퍼지 밸브를 엽니다.
② 시린지를 잡아 당기면서, 증류수/버퍼가 시린지 안에 들어오기 시작하면 천천히 10ml을 흡인하고 버퍼가 새어 나가지 않도록 밸브를 원상태로 잘 조여줍니다.
③ 이것으로 인렛 튜브 A1 의 퍼지가 종료됩니다.
④ 계속해서 모든 펌프의 펌프헤드에 purging 을 실시합니다.

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☞ 펌프에 Air 가 들어가는 것을 막기 위해 모든 인렛은 증류수로 채워 놓습니다. 또한 펌프의 모든 튜핑의 연결을 확인하고 인렛 또한 꽉 잠겨져 있는지 확인합니다.

☞ Purging 후에 모든 Air bubble 이 잘 제거가 되었는지 pressure curve 를 통해 확인을 합니다. 만약 pressure curve에서 아직 Air bubble이 남아 있다면 (아래 그래프에서 Air bubble이 있는 패턴 확인), Purging 을 다시 실시하고 pressure curve 를 다시 확인합니다.

☞ 만약 Purging 후에도 Air bubble 이 남아 있다면, 100% methanol 을 사용해 보시기를 권장합니다.[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”2. ÄKTA 시스템에 샘플을 loading 할 수 있는 방법에 대해 설명해 주세요.” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”2ÄKTA 시스템에 샘플을 loading 할 수 있는 방법에 대해 설명해 주세요.” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up”]샘플을 컬럼에 주입하기 위한 방법은 크게 3가지가 있습니다.

1) Loop (Sample loop 또는 Superloop) 를 이용하는 방법
2) Sample Pump로 직접 주입하는 방법
3) System Pump로 직접 주입하는 방법입니다.

 

1) Loop (Sample loop 또는 Superloop) 를 이용하는 방법

1-1) 먼저 loop 를 이용하는 방법 중 Sample loop 가 있습니다. Sample loop는 정해진 양의 tube 형태의 loop만 연결하면 되는 간편성 때문에 가장 많이 사용되고 있습니다. 이 경우, 정량의 Sample 을 주입하고자 할 경우에는 아래 그림에서와 같이 loop 내부에서의 유체의 흐름에 따른 패턴 때문에, 사용하고자 하는 loop 의 부피를 다 쓰고 싶다면 loop 부피의 2배 이상을 넣어주시거나 아니면 아래 그림의 세 번째 경우와 같이 절반 이하의 부피를 사용해 loop 부피보다 적은 양의 Sample 만을 걸어 놓을 수도 있습니다. 다만 소량의 샘플을 사용하고자 하는 경우에는 미리 loading buffer 로 loop 내부를 채워주셔야 공기가 유입되는 것을 방지 할 수 있습니다. 또한 실제 주입 시에도 loop 부피의 2배 이상을 “empty loop” 에 지정을 해주셔야만 loop 내부의 모든 Sample 이 컬럼으로 주입 될 수 있습니다.

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1-2) 그 다음 loop 를 이용하는 방법 중 superloop 가 있습니다. Sample loop 를 사용하기에는 많은 양 또는 여러 번의 실험을 하고자 할 경우 사용되는 실린더 형태의 superloop (10, 50, 150ml) 가 존재합니다.

[Superloop 준비하는 방법]
Superloop 를 system에 연결하기 전에 아래 그림처럼 윗쪽 뚜껑을 제거합니다.

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Superloop의 움직일 수 있는 seal의 방향이 아래로 가게 두고 글래스 실린더 안에 버퍼를 채웁니다. Superloop 위쪽을 다시 채우고 superloop 안 쪽에 기포가 들어가지 않게 합니다.
움직이는 seal 이 superloop 의 아래쪽으로 가게 합니다 (왼쪽) 버퍼를 채웁니다.

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[Superloop 의 샘플을 채우고 비우는 방법]
Superloop는 injection valve 에 연결을 시키고 buffer 로 채웁니다. 샘플은 아래에서 채워지고 또는 Sample Pump를 사용하거나 시린지를 이용해서 채울 수가 있습니다. 샘플은 superloop의 윗부분부터 버퍼를 밀어냄으로 채워지고 seal은 superloop 바닥으로 내려갑니다. (아래그림 참조) loading mode 로 바뀐 후 Sample 을 column 에 loading 합니다.

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Superloop에 샘플을 채우고 비우는 방법. 노란색이 샘플, 파란색이 버퍼

[superloop사용시 주의해야 할 사항]
☞ superloop는 제한된 압력 범위가 있습니다. 10, 50ml superloop는 4MPa이 최대압력이고, 150ml superloop의 경우는 2MPa 이 최대압력입니다
☞superloop 의 움직이는 seal는 fluorocarbon 고무로 된 O 링이 들어 있습니다. 이 O링의 경우 solvent에 매우 약하기 때문에 주의하여 사용해 주시기 바랍니다.

 

2) 샘플 펌프를 이용하여 샘플을 로딩하는 방법

샘플 펌프는 컬럼에 바로 로딩을 할 수가 있습니다. Flow path 에 샘플 펌프를 포함하고 있습니다. 펌프를 사용하면 원하는 볼륨을 컬럼에 다 로딩 할 수가 있습니다. 샘플 보관함이 다 비워지고 기포가 Air 센서를 자극하면, 샘플밸브는 다른 포트로 돌려지게 됩니다. 이렇게 함으로써 컬럼에 기포가 들어가는 것을 방지합니다.

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☞ 정확한 볼륨이 전달 되기 위해서는, 기포가 펌프에서 제거되어야 합니다.
☞ 샘플 bottle에서 injection valve까지의 flow path 는 샘플을 application 하기 전에 샘플로 채워져 있어야 합니다. Flow path 가 미리 채워져 있지 않으면, 실지 컬럼에 로딩 된 볼륨은 예상했던 것보다 적을 수 있습니다.

 

3) System Pump 를 이용하여 샘플을 로딩하는 방법

Sample Pump 대신에 system Pump A2 (default) 를 이용하여 injection 하는 방법입니다. 하지만 오염이 될 수 있으므로 권장하지 않습니다.[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”3. CIP 방법에 대해서 설명해주세요.” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”3CIP 방법에 대해서 설명해주세요.” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up”]A. CIP를 왜 수행 하여야 하나요?
버퍼에 존재하는 염들은, ÄKTA System 의 튜브와 Valve에 쌓여 흐름을 방해 또는, 작동을 방해 할 수 있습니다. 그렇기 때문에 반드시 ÄKTA 를 사용 하신 후, Wash 를 반드시 수행 하여야 합니다. 또한, Inlet valve 에 관련된 Tube 의 경우, Sample 을 사용 하신 후 씻어 줌으로써 문제 발생을 예방 해 주시기 바랍니다.

B. ÄKTA System CIP 방법.
일주일에 한번, 0.5M – 1M NaOH 를 사용하여, 일반적인 속도의 Flow rate 으로, 전체 System 을 흘려 줍니다. 이때, Column 은 By pass 또는 제거를 하여, Column 으로 Cleaning solution이 흘러 들어가지 않도록 주의 합니다. 또한, 이때, Electrode를 Dummy로 반드시 교체 해주셔야 합니다.

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Table 1. Cleaning Solutions

C. ÄKTA System 유지 방법.
2일 이상 사용 하지 않을 경우, 20% EtOH를 사용하여, 전체 System 을 채워 주어, 미생물의 번식을 예방 해 주시는 것이 좋습니다. 이를 수행 하기 이전에, ÄKTA System을 물로 충분히 씻어내어, 염의 침전을 예방 해 주시기 바랍니다

D. System Pump 유지 방법.
염의 침전은 Valve, Tube, Pump등의 수명을 단축 시키는 주 원인 중에 하나 입니다. 그렇기 때문에 Pump는 ÄKTA 를 사용 후, 반드시 염이 없는 버퍼 또는 물로 씻어 주시기 바랍니다. 대부분의 ÄKTA System 은 20% EtOH 를 Back Wash Solution 으로 사용 함으로써, 윤활 역할 뿐만 아니라, 미생물의 번식을 막는 용도로 사용이 됩니다. 그렇기 때문에 2주에 한번은 해당 Solution을 깨끗한 것으로 교체 해 주시기 바랍니다.

E. Sample Pump 의 유지방법.
Sample Pump 는 Sample 을 주요하게 다루는 부위로써, 오염되기 쉬운 환경과 자주 접하게 됩니다. 그렇게 때문에 반드시, 사용 하신 후, 염이 없는 버퍼, 물, 그리고 20% EtOH 로 씻어 주시기 바랍니다.

F. UV/Vis flow cell 유지방법.
일반적으로 사용 되는 Cleaning 방법은, 10% DeconTM 90을 사용 하는 것 입니다. 소량의 해당 Solution 을 Syringe에 넣어 바로 Flow cell 에 넣고, 최소 20분 정도 유지 한 후, 물로 씻어 주는 것 입니다. Detergent 를 사용 하면 안되는 경우, 또는 더 강한 Cleaning 이 필요 한 경우, 아래의 Solution 을 사용 해 보시길 바랍니다.

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Table 2. Solution for cleaning of UV/Vis flow cell

G. pH Electrode
pH Electrode 는 ÄKTA system 에서 가장 예민한 유닛 입니다. 그렇기 때문에, 아래에 나와있는 Solution 을 사용하여, Cleaning 을 수행 하여 주시기 바랍니다. Cleaning 이 완료 된 후, pH 적정을 수행 하여 주시기 바랍니다.

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H. Fraction collector
Fraction collector 의 외부와 Drop synch photo cell 을 Cleaning 하여 주는 것이 중요 합니다. 외부의 경우 오염물질을 제거하는데 알맞은 Solution 을 사용하여 닦아 주시고, Drop synch photo cell 의 경우, 깨끗한 천을 사용하여, 주의하여 닦아 주시기 바랍니다. Cleaning 을 완료 후, Fraction collector를 작동 시켜, 올바른 위치로 Fractionation 하는지 확인 해 주시기 바랍니다.[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”4. System Pressure Check하는 방법에 대해서 설명해주세요.” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”4System Pressure Check하는 방법에 대해서 설명해주세요.” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up”]A. Alarm Pressure 설정
해당 설정은, 목표하는 Pressure 에 다다르면, System 을 자동 Pause 시키는 설정 입니다. 설정 수치는, ÄKTA System 을 사용 함에 있어서, 가장 낮은 Max pressure 를 가지는 components 에 맞춰 설정 하여 줍니다. 일반적으로, Resin 이 가지는 Max Pressure 가 가장 낮으며, 이에 맞춰 주시면 됩니다. Wizard 를 통하여 System 을 구동 할 경우, Pre-packed Column은 Column 정보에 Max pressure 가 들어가 있어서, 자동으로 Alarm pressure 가 들어가게 됩니다. 하지만, 반드시 재 확인을 해 주시기 바랍니다. Packing 을 수행한 Column 의 경우, Column 정보를 기입 할 때, Max pressure 수치를 넣어 주시기 바랍니다.

 

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Figure 1. Alarm pressure setting on manual Run

 

B. Flow restrictor (FR-902, 904)
Column 에서 기포가 발생되는 것을 방지하기 위해 back pressure 생성시키는 파트로서, FR-902(0.2 Mpa)와 FR-904n (0.4 Mpa)의 2 종류가 있습니다. 기본으로FR-902를 제공하지만, RPC 등 고압 컬럼을 사용하는 경우에는FR-902를 FR- 904로 교환 해야 합니다. 한가지, 주의할 사항은, FR-904의 경우, pH Electrode 가 해당 압력을 견디지 못하기 때문에 동시에 장착하여 사용 할 수 없습니다.

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Figure 2. FR-902는 Column내의 압력 차에 의한 Bubble이 생기는 것을 방지 하기 위하여 반대로 압력을 주게 됩니다. 그렇기 때문에 Column에 걸리는 실제 압력은 전체 압력에서 0.2Mpa를 제외한 값이 됩니다. 즉, Max pressure value 가 0.3Mpa인 Column 과 FR-902를 함께 장착 할 경우, 실제 Column이 견딜 수 있는 Max pressure는 0.5Mpa이 됩니다.

 

C. Back Pressure Check
Column 을 거치지 않은 상태의, 순수한 System Pressure를 뜻합니다. Back pressure 가 높게 되면, 사용하시는 ÄKTA system에서 사용 하실 수 있는 Pressure의 가용 범위가 줄어 들게 되며, ÄKTA 에 무리를 주게 되는 요인으로 볼 수 있습니다.

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Figure 3. System back pressure check 및 Trouble shooting

일정하게 Flow rate 을 수행 하고 있는 상태에서, Column을 제거 또는, Bypass 로 Flow Path를 변경 합니다. 그때, 여전히 Pressure 가 높다면, ÄKTA System 상에서 요인이 존재 하는 것이며, Pressure 가 정상으로 돌아 온다면, Column 및 관련 Tube에 요인이 존재 할 수 있습니다. 요인을 찾기 힘드시다면, Flow rate을 일정하게 수행하신 다음에, Tube을 하나씩 풀어 봄 으로써 문제가 발생하는 위치를 추정 할 수 있습니다.

 

D. On-Line filter

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On-line filter 가 더러워 졌을 경우, Back-pressure가 높아지며, 새로운 필터(18-1027-11: 10개 포함)로 교환해야 합니다.[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”5. Pressure calibration하는 방법에 대해서 알려주세요.” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”5Pressure calibration하는 방법에 대해서 알려주세요.” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up”]Flow rate 을 설정 하지 않았는데, Pressure 가 존재 한다면, Pressure indicator 의 Calibration이 필요합니다.

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Figure 5. Pressure Calibration

 

① Task bar: System Control
② System Panel 에서 Calibration에 들어간 후, Monitor에서 P900Press를 선택 하여 줍니다.
③ Pressure sensor의 G1/G2 valve를 열어줍니다.
④ Start calibration을 클릭합니다.
⑤ ÄKTA purifier와 컴퓨터의 전원을 내립니다.
⑥ ÄKTA Purifier를 작동시키고, Unicorn에 접속하게 되면 Pressure가 Zero에 가 있는 것을 확인 할 수 있습니다.[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”6. AKTA prime plus 와 AKTA start의 차이 (System 측면에서)는 무엇인가요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”6AKTA prime plus 와 AKTA start의 차이 (System 측면에서)는 무엇인가요?” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up”]System 이 가지는 가장 큰 차이는 펌프의 Capacity 와 UV sensor 입니다.

 

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[AKTA Prime Plus 와 AKTA Start 의 차이]

 

AKTA Start 의 경우 HiTrap Column (1ml / 5ml packed size) 과 같은 Pre-packed Column 을 손 쉽게 사용할 수 있도록 디자인 되어 있습니다.  반면에 AKTA prime plus 의 경우 50ml/min 의 유속을 사용 할 수 있으며, 1 Mpa까지 적용 가능합니다.  AKTA prime plus의 UV lamp는Hg lamp 로써, 280nm 와 254nm를 측정 할 수 있습니다. 해당 UV lamp는 15min 이상의 예열과정을 통해서 원활한 사용이 가능하며, 저온실 에서 사용하실 경우, Lamp 의 수명이 단축될 수 있습니다.  AKTA Start 의 UV lamp 는 LED Type 으로써, 280nm 만을 지원 하며, 예열 과정이 필요 없고, 반 영구적으로 사용 가능합니다.[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”7. AKTA System에 나타나는 압력은 어떠한 의미를 담고 있나요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”7AKTA System에 나타나는 압력은 어떠한 의미를 담고 있나요?” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up”]eS_FAQ_AKTA_7

AKTA system 에서는 System pressure 를 측정 합니다. 이는 Column 에 작용하는 압력입니다.  Column 의 선단 과 후단의 압력은 Resin의 존재 때문에 상당량 차이가 발생 할 수 있으며, 이에 의하여 Column 내부에 공기 방울을 형성 할 수 있습니다.  Flow restrictor (FR-902)를 column 후단에 설치 하게 되면, Flow 방향의 역 방으로 0.2 Mpa 을 가해주어, Column 내의 압력 변화를 줄여 줌으로써, 공기 방울의 형성을 방지 할 수 있습니다. FR-902에 의하여 형성되는 압력은, 전체 System pressure 에 더해져서 나타나지만, Column 의 Resin 에 작용하는 System pressure 보다 작아집니다. 예를 들어, FR-902 를 장착한 상태에서 측정되는 System pressure인 0.5 Mpa 은 FR-902가 형성하는 역방향 압력 0.2 Mpa 을 포함한 값이므로. Resin 에 걸리는 압력은 0.3 Mpa (0.5M pa – 0.2 Mpa = 0.3 Mpa) 입니다.

[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”8. Ion Exchange chromatography에 사용할 수 있는 Buffer가 어떤 것이 있나요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”8Ion Exchange chromatography에 사용할 수 있는 Buffer가 어떤 것이 있나요?” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up”]Ion exchange chromatography Media Ligand 는 전기적 성향을 지니고 있습니다.  Cation exchanger의 경우는 (-) 를 지니고 있으며, Anion exchanger의 경우는 (+) 를 지니고 있습니다.  그렇기 때문에, 사용하고자 하는 Buffer 와 레진이 맞지 않으면, 타겟단백질이 Ligand 에 결합 하는 것을 방해 할 수 있습니다.

 

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[추천 buffer: Cation Exchange Chromatography]

eS_FAQ_AKTA_8_1

[추천 buffer: Anion Exchange Chromatography]

[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”9. Piston Pump type을 가지는 AKTA system (AKTA purifier, explorer, pure, avant) 은 어떠한 이유로, 하나의 Buffer Inlet 에 두 개의 Pump Head를 가지고 있는 것 일까요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”9Piston Pump type을 가지는 AKTA system (AKTA purifier, explorer, pure, avant) 은 어떠한 이유로, 하나의 Buffer Inlet 에 두 개의 Pump Head를 가지고 있는 것 일까요?” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up”]eS_FAQ_AKTA_9

Inlet 하나를 담당하는 Pump는 두 개의 Pump Head를 가지고 있습니다.  이는 하나의 Pump가 가지는 Pulsation를 줄이기 위해서 입니다.  한 쪽이 당긴다면, 다른 한쪽은 미는 방식으로 작동하며, 이러한 방식으로 Pulsation을 최소화 합니다.  만약 Pump Head 가 Inlet 당 하나만 존재 한다면, Buffer inlet 으로 부터 Buffer를 Pump로 당길 때, System 으로는 Buffer가 흐르지 못하여, 문제가 발생 합니다.[/ultimate_modal][/vc_column][/vc_row][vc_row row_type=”row” use_row_as_full_screen_section=”no” type=”full_width” angled_section=”no” text_align=”left” background_image_as_pattern=”without_pattern” css_animation=”” el_class=”tab-style tab_1200″ el_id=”tab2″][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-0″]일반[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-1″]ÄKTA[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″ el_class=”active”][vc_column_text el_class=”tab-2″]Biacore[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-3″]AI 680[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-4″]Column & Resin[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-5″]소모품[/vc_column_text][/vc_column][/vc_row][vc_row row_type=”row” use_row_as_full_screen_section=”no” type=”full_width” angled_section=”no” text_align=”left” background_image_as_pattern=”without_pattern” css_animation=”” el_class=”popup_wrp contant_wrp_100 faq_wrp”][vc_column][ultimate_modal modal_title=”1. Biacore 교육을 받으려고 하는데 어떤 사항을 준비 해야 하나요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”1Biacore 교육을 받으려고 하는데 어떤 사항을 준비 해야 하나요?” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]기본 교육은 getting started kit를 사용하여 CM5 Chip에 amine coupling 방법으로 고정화 하는 실험으로 진행을 합니다. 필요한 Biacore T Series와 3000에 대한 소모품 리스트는 아래 표와 같습니다.

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소모품은 지역 담당 대리점을 통해 구매가 가능하며, 담당 대리점 연락처는 아래와 같습니다.

faq_baiacore_02

처음 시작하시는 분들은 getting started kit를 이용하여 기기 operation에 대해서 충분히 연습을 하신 후 sample을 이용하시는 것을 권장 드립니다.[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”2. Rmax란 무엇이며 설정 기준은 무엇인가요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”2Rmax란 무엇이면 설정 기준은 무엇인가요?” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]faq_bia1_1

  • R = response
  • MW = molecular weight
  • n = stoichiometry (analyte/ligand)

 

Rmax는 위의 식에 의해서 계산이 되어지며, Chip에 고정화 시킨 리간드가 analyte와 100%결합을 했을 때의 반응 RU를 의미합니다. 예를 들어 1:1 interaction에서 리간드와 analyte의 분자량이 각각50kDa, 100kDa인 단백질의 상호작용을 볼 때, 50kDa의 리간드를 50RU를 고정화 시키고 100kDa의 analyte를 흘려주었을 때, 최대 binding level은 Rmax인 100RU라는 의미 입니다.

Rmax의 설정 기준은 각 물질의 분자량, affinity에 따라 다르나, 대략 T series의 경우는 40RU[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”3. 장비 사용료를 지불하고 Biacore장비를 사용할 수 있는 연구소나 학교의 정보를 알려주세요.” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”3장비 사용료를 지불하고 Biacore장비를 사용할 수 있는 연구소나 학교의 정보를 알려주세요.” txt_color=”#555555″ modal_size=”block” modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]biacore-%ec%82%ac%ec%9a%a9%ea%b8%b0%ea%b4%80_%ec%9b%8c%ed%81%ac%ec%83%b5final[/ultimate_modal][/vc_column][/vc_row][vc_row row_type=”row” use_row_as_full_screen_section=”no” type=”full_width” angled_section=”no” text_align=”left” background_image_as_pattern=”without_pattern” css_animation=”” el_class=”tab-style tab_1200″ el_id=”tab3″][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-0″]일반[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-1″]ÄKTA[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-2″]Biacore[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″ el_class=”active”][vc_column_text el_class=”tab-3″]AI 680[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-4″]Column & Resin[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-5″]소모품[/vc_column_text][/vc_column][/vc_row][vc_row row_type=”row” use_row_as_full_screen_section=”no” type=”full_width” angled_section=”no” text_align=”left” background_image_as_pattern=”without_pattern” css_animation=”” el_class=”popup_wrp contant_wrp_100 faq_wrp”][vc_column][ultimate_modal modal_title=”1. Amersham Imager 600이나 LAS에서 찍은 이미지를 16bit로 저장해서 window 7에서 열면, 이미지가 제대로 구현이 안됩니다. 이미지를 제대로 볼 수 있는 방법을 알려주세요.” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”1Amersham Imager 600이나 LAS에서 찍은 이미지를 16bit로 저장해서 window 7에서 열면, 이미지가 제대로 구현이 안됩니다. 이미지를 제대로 볼 수 있는 방법을 알려주세요.” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]Amersham Imager 600이나 LAS 장비로 찍은 16bit 이미지는 IQTL이라는 전용 분석 소프트웨어에서만 원래 데이터를 제대로 구현해 낼 수 있습니다.

만일 Window XP에서 이미지를 클릭해서 view용으로 보기만 하고자 하실 때는 8bit TIFF로 저장하시면 되지만, 논문용의 이미지가 필요하신 경우에는 16bit 가 필요하므로, 함께 저장해서 준비하시는 것을 추천드립니다.[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”2. Amersham Imager 600이나 LAS 장비에서 찍은 이미지를 IQTL로 가져 가면, 너무 진하게 보이면서 background가 올라오는 것처럼 contrast가 변합니다. LAS에서 본 이미징 그대로 볼 수 있는 방법이 궁금해요.” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”2Amersham Imager 600이나 LAS 장비에서 찍은 이미지를 IQTL로 가져 가면, 너무 진하게 보이면서 background가 올라오는 것처럼 contrast가 변합니다. LAS에서 본 이미징 그대로 볼 수 있는 방법이 궁금해요.” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]Amersham Imager 600와 LAS는 16bit를 구현합니다.

즉, 0에서 65536의 range에서 sample signal intensity를 보기 때문에 sample signal이 강하게 보이지 않지만, IQTL software는 contrast range를 자동으로 sample 주위로 좁혀서 보여주기 때문에 background가 올라오는 것 처럼 보이게 됩니다.

이때는 IQTL 소프트웨어 상단에 있는 contrast를 클릭하신 후, max 값을 보여주는 box내에 15000 또는 20000의 값을 입력하시면 LAS에서 보셨던 이미지 그대로 보실 수 있습니다.[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”3. 상단(화학 발광 만 대응)과 하단(모든 촬영 모드)로 촬영 한 경우, 파일 크기가 어떻게 다른가요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”3상단(화학 발광 만 대응)과 하단(모든 촬영 모드)로 촬영 한 경우, 파일 크기가 어떻게 다른가요?” txt_color=”#555555″ modal_size=”container” modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]

  • 상단에서 촬영하는 경우: 16 bit의 Gray Scale Tif 파일 (원시 데이터)는 약 3 MB의 파일 크기입니다. JPG 컬러 이미지는 약 30 KB 파일 크기입니다.
  • 하단에 촬영 한 경우: 16 bit의 Gray Scale Tif 파일 (원시 데이터)는 11 MB의 파일 크기입니다. JPG 컬러 이미지는 약 150 KB의 파일 크기입니다.

[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”4. Amersham Imager 600 (전기종)에서 촬영 한 이미지는 장치 본체에 몇 장까지 저장할 수 있습니까?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”4Amersham Imager 600 (전기종)에서 촬영 한 이미지는 장치 본체에 몇 장까지 저장할 수 있습니까?” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]A. 500 장 정도입니다.[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”5. Amersham Imager 600 (전기종) 장치 본체에 저장 한 이미지 데이터가 꽉 차면 어떻게 이미지를 저장할 수 있을까요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”5Amersham Imager 600 (전기종) 장치 본체에 저장 한 이미지 데이터가 꽉 차면 어떻게 이미지를 저장할 수 있을까요?” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]A. 하드 디스크의 90 % 정도 까지 되면 여유 공간이 부족하다는 메시지가 표시되고 100 %가 되면 이전 이미지 데이터를 덮어 쓰도록 되어 있습니다. 외부저장매체에 저장 해야합니다.[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”6. Chemiluminescence에서 각각의 촬영 모드는 어떻게 촬영이 되는 것인가요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”6Chemiluminescence에서 각각의 촬영 모드는 어떻게 촬영이 되는 것인가요?” txt_color=”#555555″ modal_size=”container” modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]

  • Auto: CCD가 Detection되는 최대 신호가 약 30000 – 40000이되도록 노출 시간을 자동으로 설정하고 촬영합니다.
  • Semi-auto: 일단 기기 자체에서 테스트 촬영 후 원하는 band를 지정하게 되면, 지정된 영역의 신호가 약 30000 – 40000이되도록 노출 시간을 자동으로 설정하고 촬영합니다.
  • Manual: Exposure Time (노출 시간)을 설정하고 촬영합니다. 긴 노출 시간은 1 시간까지 촬영이 가능합니다.
  • Incremental: Interval Time에서 설정 한 시간마다 노출 사진을 촬영하고 최대 12 장까지 촬영이 가능합니다.
  • Advanced: 촬영 이미지의 개수, 각 이미지의 exposure time 및 waiting time을 설정하여 촬영이 가능한 모드입니다.

[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”7. Amersham Imager 600에서 촬영한 이미지는 어떤 형식으로 저장이 되나요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”7Amersham Imager 600에서 촬영한 이미지는 어떤 형식으로 저장이 되나요?” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]

  • Chemiluminescence 및 형광 이미지 : 16bit Gray Scale tif 파일
  • “Colorimetric marker”에 체크 한 경우에는 다음 이미지 파일형식으로도 저장됩니다.
  • Colorimetric marker 이미지: 16bit Gray Scale tif 파일
  • Colorimetric marker + western 이미지 : JPG 파일
  • Colorimetric marker 만의 컬러 이미지 : JPG 파일
  • 정량분석을 한 경우 : CSV 파일

[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”8. GE판 LAS4000을 Windows XP, Windows 10에 설치하는 방법이 궁금합니다.” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”8GE판 LAS4000을 Windows XP, Windows 10에 설치하는 방법이 궁금합니다.” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]GE판 LAS4000을 Windows 10에 설치하는 경우, Control software ver 1.3이 필요합니다.

“Install the software automatically(recommended)로 USB fuction driver가 설치 되지 않을 경우에는 Install from a list or specific location(advanced)로 설치해 주십시오. 방법은 USB Control의 설치 방법과 동일하며 설치 파일은 USB function 폴더에서 찾을 수 있습니다.”

소프트웨어 설치가 끝나시면 아래의 세 항목을 순서대로 실시하시면 장비를 구동하실 수 있습니다.
1. Filter customization
2. CCD calibration
3. Flat frame calibration
각 항목에 대한 자세한 설명은 user manual에서 찾을 수 있습니다.

windows XP 용 설치 안내 >[/ultimate_modal][/vc_column][/vc_row][vc_row row_type=”row” use_row_as_full_screen_section=”no” type=”full_width” angled_section=”no” text_align=”left” background_image_as_pattern=”without_pattern” css_animation=”” el_class=”tab-style tab_1200″ el_id=”tab4″][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-0″]일반[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-1″]ÄKTA[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-2″]Biacore[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-3″]AI 680[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″ el_class=”active”][vc_column_text el_class=”tab-4″]Column & Resin[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-5″]소모품[/vc_column_text][/vc_column][/vc_row][vc_row row_type=”row” use_row_as_full_screen_section=”no” type=”full_width” angled_section=”no” text_align=”left” background_image_as_pattern=”without_pattern” css_animation=”” el_class=”popup_wrp contant_wrp_100 faq_wrp”][vc_column][ultimate_modal modal_title=”1. 컬럼 팩킹에 대해서 알려주세요.” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”1컬럼 팩킹에 대해서 알려주세요.” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]컬럼은 기본적으로 충진되는 크로마토그래픽 미디아 (레진)의 특성에 따라서 제대로 된 성능이나 장기적인 사용을 위해 적절하게 팩킹이 되어야 합니다. 그렇기 때문에 컬럼팩킹은 사용되는 레진과 컬럼의 타입에 따라서 팩킹방법이 적절히 선택이 되어야 하며, 기본적으로는 Flow/pressure 방법을 사용하여 빈 컬럼의 튜브내부에 적절한 농도의 레진슬러리를 부어준 뒤에 상단 아답터를 통해 팩킹용액을 일정유속, 또는 일정압력을 주어 팩킹을 진행하게 됩니다.

컬럼팩킹이론

팩킹이 제대로 진행이 되어야 하는 이유는 컬럼의 타입이나 레진의 특성 또는 사용될 조건을 고려하지 않은 채 팩킹이 되면, 분리효능자체에도 문제가 생길 수 있으며, 사용하면서 컬럼 내부 상태가 변하거나 레진이 변성될 수 있기 때문입니다.

컬럼 타입에 따른 팩킹 동영상 클릭

Lab column (XK, Tricorn, HiScale) Process column (BPG)[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”2. 컬럼을 팩킹했는데, 제대로 팩킹한 것인지, 또는 오래동안 보관했던 컬럼을 사용해도 되는 것인지 어떻게 하면 알 수 있나요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”2컬럼을 팩킹했는데, 제대로 팩킹한 것인지, 또는 오래동안 보관했던 컬럼을 사용해도 되는 것인지 어떻게 하면 알 수 있나요?” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]컬럼팩킹을 한 뒤에나 오래도록 보관되었던 컬럼은 제대로 팩킹이 되었거나 유지되어 있는지에 대해 살펴볼 필요가 있으며, 일반적으로는 흡광도나 전도도의 변화를 가지고 이론단수나 비대칭성을 통해서 컬럼의 효율성을 평가하게 됩니다.

컬럼효율성 평가

추가적으로 오래도록 보관이 되어있던 경우에는 보관 전 클리닝 되었던 상태에 따라서 오염이 되는 경우가 있으므로 사용하기 전에 깨끗하게 클리닝을 한 뒤에 사용을 하시는 것이 좋고, 장기 보관시에도 주기적으로 보관용액을 갈아주시는 것이 좋습니다.[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”3. 크로마토그래피 미디아 (레진)에서 Compression Factor는 무엇인가요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”3크로마토그래피 미디아 (레진)에서 Compression Factor는 무엇인가요?” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]레진중에서도 탄성을 가지고 있는 경우, 유속이나 용액의 점도에 따라 컬럼 내부에 걸리는 압력이 달라질 수 있습니다. 이러한 경우, 걸리는 압력에 따라서 레진이 압축되었다가 압력이 풀리게 되면 원래의 상태로 돌아오기 때문에 충진된 레진의 높이가 유속이나 조건에 따라 달라질 수 있고 클리닝을 위해 Reverse flow로 흘리게 되는 경우 충진된 베드가 움직이면서 내부의 팩킹 상태가 변화할 수 있게 됩니다. 그렇기 때문에 초반에 사용조건보다 높은 압력 또는 최대 팩킹압력 등을 적용하여 적절한 압축도를 가지고 팩킹을 진행하게 되는 경우에는 이러한 부분의 문제를 감소시킬 수 있게 됩니다. Compression factor는 중력으로만 가라앉은 것 대비 실제로 팩킹되어야 하는 비율을 이야기 한 것으로 아래의 식에 대입됩니다.

 

column_media_q3_1

 

일반적으로 가장 많이 사용되시는 sepharose 계열의 레진의 경우는 1.15의 Compression factor 값을 가지게 되며 팩킹시에는 슬러리 농도와 compression factor를 모두 고려한 양을 준비해주셔야 합니다.

예를 들어 XK16/20에 10cm 정도로 Q sepharose fastflow 레진을 팩킹할 경우, 50%의 슬러리 (전체 슬러리 중 레진이 50%의 부피를 차지)의 경우에는 실제 컬럼부피를 슬러리 농도로 나누어준 다음, 압축되어야 할 compression factor 만큼이 더 필요한 것입니다.

즉, 컬럼부피 = 단면적 (2㎠) * 높이 (10cm) = 10c㎤ = 10ml

필요한 레진양 = 컬럼부피 (10ml) * Compression factor (1.15) = 11.5 ml

필요한 슬러리양 = 필요한 레진양 (11.5ml) / 슬러리 농도 (0.5) = 23 ml 로

실제로 필요한 레진양은 11.5ml로서 50%의 슬러리 23ml가 실제 팩킹을 위해 필요합니다.[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”4. Chromatographic Specification 중의 Linear Flowrate(cm/h)는 무엇을 이야기 하는 것인가요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”4Chromatographic Specification 중의 Linear Flowrate(cm/h)는 무엇을 이야기 하는 것인가요?” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]기본적으로 많이 사용하시는 것은 단위시간당 얼마만큼의 용액을 흘리는 것에 대한 volumetric flowrate를 많이 사용합니다. 다만 컬럼의 경우에는 컬럼의 높이 자체가 정제에 대한 부분과 연계가 많이 되기 때문에 컬럼의 높이에 대한 흐름의 속도를 linear flowrate 즉 선속도라고 이야기를 합니다. 부피는 높이와 단면적의 곱이기 때문에 Volumetric flowrate도 linear flowrate와 단면적의 곱으로 나타나지며, 반대로는 volumetric flowrate를 단면적으로 나누면 linear flowrate가 나옵니다.

 

column_media_q4_1

 

예를 들면 Q sepharose fastflow media는 일반적으로 최대 500cm/h까지 사용할 수 있지만 일반적으로는 50~300cm/h로 사용하며, 이를 XK16 컬럼에서 사용할 경우에는 1.7~10ml/min이고, BPG100 컬럼에서 사용할 경우에는 65~392.5ml/min정도로 사용하시게 되는 것입니다. 만일 300cm/h로 10cm 컬럼에서 사용할 경우에는 컬럼의 입구에서 출구까지 걸리는 시간이 2분 정도가 걸리는 것이며, 이를 residence time (머무름 시간)이라고 합니다.

각 레진에의 datasheet에는 각 레진이 사용될 수 있는 최대 linear flowrate 들을 대략적으로 표시하여 허용유속에 대한 기본 정보를 드립니다. 다만 시료나 용액의 점도, 또는 컬럼 사이즈에 따라 각 레진의 허용유속은 달라질 수 있음을 명심해주십시오.[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”5. Column에서의 Scale up은 어떻게 하나요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”5Column에서의 Scale up은 어떻게 하나요?” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]크로마토그래피는 기본적으로 단백질과 레진 (resin)의 성격에 따라서 흡착과 비흡착으로 나눌 수 있습니다. 즉 화학적 성질 (정전기적 인력, 소수성,친화성 등)을 이용해서 레진과 흡착시킨 뒤 용출시키거나, 물리적인 성질 (크기, 모양)을 이용해서 분리 정제를 진행하게 됩니다.

일반적으로 연구소에서 타겟단백질과 불순물의 특성에 따라 컬럼/레진/버퍼를 선택하고 유속/전도도/염농도 등의 실험조건을 개발 및 최적화한 후에,필요에 따라서 파일럿 또는 생산스케일로 하는데, 이것을 scale up이라고 합니다.

기본적으로 정제하고자 하는 타겟단백질의 양이 증가하게 되면 정제를 위한 컬럼의 크기도 같이 커져야 합니다.  그 경우, 일반적으로 컬럼직경과 컬럼높이 중 컬럼직경을 늘이는 방식으로 진행합니다. 이유는 컬럼높이를 증가하게 되면 유속에 따른 머무름시간이나 샘플이 통과하는 경로가 변동이 되어서 크로마토그래피의 패턴이 바뀔 수 있기 때문입니다.

그렇기 때문에 선속도와 컬럼높이를 유지한다면 타겟단백질은 큰 컬럼에서도 작은 컬럼에서와 거의 동일한 조건을 갖게 되기 때문에 컬럼부피의 비율에 따른 크로마트그래피의 패턴을 유지할 수 있습니다.

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추가고려사항에 있는 벽면효과 (Wall effect)란 직경이 커질수록 연성 또는 반경성의 레진은 유속에 따라 충진된 베드의 높이가 균일하게 유지되기 어렵다는 것으로, 이는 컬럼높이가 분리능에 직결되는 젤여과크로마토그래피의 경우에 영향을 많이 주기때문에 그림과 같이 섹션을 나누어 진행하는 것을 추천합니다.

 

fag_column_5_[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”6. Binding Capacity란 무엇인가요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”6Binding Capacity란 무엇인가요?” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]컬럼으로 정제를 진행할 경우에 어느 정도의 샘플을 흡착할 수 있는지를 알아두어야 경제성을 고려한 실험조건을 마련할 수 있습니다. 결합능력(Binding Capacity)이란 해당 레진이 타겟단백질과 결합할 수 있는 능력을 말하며 크게 정적 결합능력 (Static Binding Capacity, SBC)와 동적 결합능력 (Dynamic Binding Capacity, DBC)로 나눕니다.  SBC는 레진자체가 샘플과 결합할 수 있는 최대 능력이라고 생각하면 되고, DBC는 일정한 실험조건에서의 결합할 수 있는 능력으로 볼 수 있으며, 실제 실험에서는 사용하시는 레진에 따른 샘플의 DBC를 알고 계시는 것이 좋습니다.  이유는 결합능력에 비해 너무 적은 샘플을 로딩할 경우에는 컬럼의 결합능력을 다 사용하지 못하고, 너무 많은 샘플을 로딩할 경우에는 타겟단백질이 결합하지 못한 채 버려질 수 있기 때문입니다.

DBC는 컬럼에 모든 타겟단백질이 결합된 후, 용출되기 시작하는 시점을 측정해서 얻는 값이며, 일반적으로 로딩한 타겟 단백질의 10%의 농도가 측정되는 시점을 기점 (Q10%: Binding Capacity at 10% Breakthrough point)으로 잡습니다.  자세한 사항은 Column>Theory>Dynamic Capacity를 참조해주십시오.[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”7. 레진의 유효기간은 어떻게 되나요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”7레진의 유효기간은 어떻게 되나요?” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]GE에서 제공하는 레진 (resin) Expiry date란 사용하지 않은 레진을 기준으로 COA (Certificate of Analysis: 성적증명서)에 나온 기준값에 대해서 GE가 보증하는 기간을 의미합니다.  실제적으로 레진을 사용하실 때에는 이와는 별도로, 사용하는 정제 프로세스에 따라서 별도의 Lifetime study를 진행하셔서 최대로 사용할 수 있는 cycle을 검증해야 합니다.  이는 보통 Small scale에서 예측한 뒤에, Large scale에서 확인을 하는 방식으로 진행합니다.  각각의 타겟단백질과 불순물, 그리고 Cleaning 방식에 따라서 레진의 Lifetime은 달라지므로 고객이 직접 검증을 해주셔야 하며, GE에서는 각 레진마다 정제 프로세스 중에서 일반적으로 가장 가혹한 조건인 CIP (Cleaninig-in-Place)를 기준으로 해서 레진의 성능이 유지되는 기간을 조사하기도 합니다.

 

BioProcessTM Chromatography media-Lifetime studies

The lifetime of a chromatography media (resin) is dependent on the process where it is used. In-process materials such as product and other components are specific for each process. It is therefore important that lifetime investigation on the actual process is performed. Lifetime can be estimated in small scale cycling studies and later confirmed at manufacturing scale under a validation period.

As part of GE Healthcare Life Sciences development program for new BioProcess chromatography media, lifetime investigations are performed. The intention of the investigations is to decide on a CIP(Cleaning in Place) protocol that can be recommended and to prove the media lifetime for a specified number of CIP-cycles. Exposure to a CIP-protocol for a number of cycles with or without feed sample is investigated. Results from lifetime investigations are presented in the Regulatory Support File of a product and can be used by GE Healthcare customers to design a CIP –protocol and determine the lifetime of the chromatography media in their specific process.[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”8. Chromatography Resin의 Matrix 별 최대 압력은 어떻게 다른가요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”8Chromatography Resin의 Matrix 별 최대 압력은 어떻게 다른가요?” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]fag_column_8[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”9. Buffer 가 부족하여, Column 이 완전히 Dry 되었습니다. Column 을 재 사용 할 수 있을 까요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”9Buffer 가 부족하여, Column 이 완전히 Dry 되었습니다. Column 을 재 사용 할 수 있을 까요?” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up”]어떠한 종류의 Column도 Dry 되기 전의 Column Performance를 재현하기가 매우 힘듭니다.  Gel filtration (GF) Column 의 경우, Packed Bed의 상태에 따라 크로마토그램의 분리능에 큰 영향을 주는 Chromatography column이기 때문에, 레진이 Dry 되면 Packed Bed에 Cracking을 형성 할 수 있어서, 재 기능을 잃을 수 있습니다.  그렇기 때문에, Re-Packing을 추천 드립니다.  Cracking 의 형성은 또한, Ion Exchange chromatography (IEX)와 Affinity chromatography (AC) 에도 영향을 줍니다.  재 사용을 원하실 경우에는, 20% EtOH 을 이용하여, Column내의 공기를 최대한 제거를 해 주신 후, Column Packing Evaluation을 통하여 레진의 Quality 를 확인 하시는 것을 추천 드립니다.  Adsorption chromatography (IEX, AC) 레진의 Dry는 Ligand 에 영향을 줄 가능성 또한 있어서, 사용 하시 기전에, 샘플을 사용하여, Dry 전과 후의 크로마토그램 결과를 비교하는 과정이 필요합니다.[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”10. Sephadex resin을 어떻게 사용할 수 있는지 알려주세요.” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”10Sephadex resin을 어떻게 사용할 수 있는지 알려주세요.” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up”]GE 실험길라잡이 자료실 내 한글자료모음 페이지의 [All about Sephadex 설명서]를 참고하세요. 바로 가기[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”11. GST-tagged protein을 어떻게 정제할 수 있을까요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”11GST-tagged protein을 어떻게 정제할 수 있을까요?” txt_color=”#555555″ modal_size=”block” modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up”][GST-tagged Protein의 정제과정]

 [1] 정제도

      • PreScission Protease를 사용해서 GST-tagged proteins을 정제하는 방법

 

 

gst2

 

      • Thrombin이나 Factor Xa을 사용해서 GST-tagged proteins을 정제하는 방법

 

 

gst1

이미지 크게 보기

[2] Cleavage enzyme에 따른 구분

faq1

더 자세한 내용은 2016년 [Affinity Chromatography vol.2 tagged protein] 핸드북의 chapter 5.를 참고하시기 바랍니다. 

첨부 파일: Protocol: Purification and cleavage
[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”12. HiTrap column으로 정제할 때 사용하는 connectors를 소개해 주세요.” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”12HiTrap column으로 정제할 때 사용하는 connectors를 소개해 주세요.” txt_color=”#555555″ modal_size=”block” modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up”]

① HiTrap컬럼 Top을
Syringe에 연결하기
1
1/16" male/luer female
(18-1112-51)
11
② HiTrap컬럼 Top을
AKTA system에 연결하기-1
2
1/16" male connector
(28-4010-81)
21
③ HiTrap컬럼 Top을
AKTA system에 연결하기-2
3-1
3-2
Union M6 female /1/16” male
(18-3858-01)

31
④ HiTrap컬럼 Top에
tubing을 연결하기
4-2
4
Tubing connector flangeless/M6 male
(18-1017-98)
31
⑤ HiTrap column Top을
막기
5
Fingertight stop plug, 1/16"
(11-0003-55)
31
⑥ HiTrap컬럼 Bottom을
AKTA system에 연결하기
6-1
6-2
Union 1/16” female/M6 male
(18-1112-57)
31
⑦ HiTrap컬럼 Bottom을
syringe에 연결하기
& M6 Flanged Fitting으로
Syringe를 tubing에 연결하기
7
7-2
Union luerlock
(18-1027-12)
31
31
⑧ HiTrap컬럼 Bottom을
tubing에 연결하기
8-1
8-2
Tubing connector flangeless/M6 female
(18-1003-68)
31
⑨ HiTrap컬럼 Bottom을
막기
9
Stop plug female, 1/16”
(11-0004-64)
31

AKTA Accessories 어플의 Fittings에서 더 많은 connectors를 확인하시기 바랍니다. 

atka_appatka_app_1[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”13. AKTA를 사용해서 정제할 때 유용한 connectors를 소개해 주세요.” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”13AKTA를 사용해서 정제할 때 유용한 connectors를 소개해 주세요.” txt_color=”#555555″ modal_size=”block” modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up”]

① Tubing간 연결하기-1
(id 0.3 mm, PEEK Union)

111
Union Fingertight
(11-0008-52)
12
② Tubing간 연결하기-2
(id 1.0 mm, PEEK Union)

111
Union 1/16" female-1/16"
female (11-0003-39)
13
③ Tubing간 연결하기-3
(id 0.5 mm, 티타늄 Union)

111
3332
Union 1/16" female-1/16"
female (18-3855-01)
14
④ Low Dead Volume으로 연결하기111
Union 1/16 male/male i.d. 0.5 mm
(28-9543-26)
15
⑤ 1/16인치 Tubing에
connector와 Ferrule연결하기
111
Tubing connectors,
1/16 (18-1127-07)
16
⑥ 3/16인치 Tubing에
connector와 Ferrule연결하기
6661
6662
Tubing connectors,
3/16 (18-1112-49)
17
⑦ 1/8인치 Tubing에
connector와 Ferrule연결하기
7771
7772
Tubing connectors,
1/8 (18-1121-17)
18
⑧ 1/16인치
tubing에 연결하기
111
Fingertight connector 1/16” male
(18-1112-55)
19
111
Fingertight connector 1/16” male
(18-1172-63)

AKTA Accessories 어플의 Fittings에서 더 많은 connectors를 확인하시기 바랍니다. 

atka_appatka_app_1[/ultimate_modal][/vc_column][/vc_row][vc_row row_type=”row” use_row_as_full_screen_section=”no” type=”full_width” angled_section=”no” text_align=”left” background_image_as_pattern=”without_pattern” css_animation=”” el_class=”tab-style tab_1200″ el_id=”tab5″][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-0″]일반[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-1″]ÄKTA[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-2″]Biacore[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-3″]AI 680[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″][vc_column_text el_class=”tab-4″]Column & Resin[/vc_column_text][/vc_column][vc_column width=”1/6″ el_class=”active”][vc_column_text el_class=”tab-5″]소모품[/vc_column_text][/vc_column][/vc_row][vc_row row_type=”row” use_row_as_full_screen_section=”no” type=”full_width” angled_section=”no” text_align=”left” background_image_as_pattern=”without_pattern” css_animation=”” el_class=”popup_wrp contant_wrp_100 faq_wrp”][vc_column][ultimate_modal modal_title=”1. SE250 part 문의” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”1SE250 part 문의” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]SE250은 10 x 8 cm의 mini gel 전기영동을 위한 장비입니다. 제품과 관련한 package등 part에 대한 정보는 아래와 같습니다.

Gel Casters (Spare Parts)       

 80-6146-50, SE245

소모품_FAQ_list_1

Dual gel caster, for casting 1-2 gels in 10 x 8 cm or 10 x 10.5 cm plates used in the SE 250, SE 260 or miniVE vertical electrophoresis unit.

NOTE: Unit is shipped with the clamp screws facing inwards. When in use, the clamp assemblies should be aligned with the screws facing outwards.

Includes: Casting cradle, 2 clamp assemblies, 2 gaskets and 4 black cams. (Order plates, spacers and combs separately.) Casting cradle, 2 clamp assemblies, 2 gaskets and 4 black cams. (Order plates, spacers and combs separately.) Casting cradle, 2 clamp assemblies, 2 gaskets and 4 black cams. (Order plates, spacers and combs separately.)

 80-6151-06, SE275*

소모품_FAQ_list_2

 

Multiple Gel Caster (casts 2 to 4 gels, for SE250) 4-gel multiple gel caster (front), for casting 1-4 gels in 10 x 8 cm plates used in the SE 250 mini vertical electrophoresis unit.

Includes: Casting chamber with foam rubber gasket, face plate, 10 rectangular glass plates (10 x 8 cm), 4 notched alumina plates (10 x 8 cm), 2 clamps, 100 sheets of wax paper, space-saver plate, 5 filler sheets, black vinyl cap and filler plug set. (Order SE 211A combs and SE 2119T spacers separately.)

 80-6142-51, SE215*

소모품_FAQ_list_3

Multiple Gel Caster (casts 4 to 10 gels, for SE250) 10-gel multiple gel caster (shown on the right), for casting 4-10 gels in 10 x 8 cm plates used in the SE 250 mini vertical lectrophoresis unit.

Includes: Casting chamber with foam rubber gasket, face plate, 20 rectangular glass plates (10 x 8 cm), 10 notched alumina plates (10 x 8 cm), 100 sheets of wax paper, 2 clamps, space saver plate, 5 filler sheets, black vinyl cap and filler plug set. (Order SE 211A combs and SE 2119T spacers separately.)

 

GLASS PLATES

The glass plates for the SE 250 and 260 are low fluorescing (they are water white drawn glass as opposed to float glass).

Product Quantity Code number
 Glass plates, for SE250 (10 x 8 cm):
 Rectangular glass plates 10/pk 80-6136-81, SE202P-10*
 Notched alumina plates 10/pk 80-6136-43, SE202N-10*
 Notched glass plates 5/pk 80-6136-05, SE202GN-5*

 

 80-6148-40, SE254B*

소모품_FAQ_list_4

1
UBC. Includes foam gaskets.
Upper buffer chamber (UBC cooling core), for SE250 and SE260.

Replacement upper buffer chamber (UBC), for the SE 250 or SE 260 mini vertical electrophoresis unit. This UBC also serves as the cooling core.

 80-6137-19, SE208* 1Foam gasket, grey, 61 cm long x 4.5 mm diameter, for the UBC of the SE 250 or SE 260 mini vertical electrophoresis unit, or for the casting chamber of the SE 215, SE 275, SE 615 or SE 675 multiple gel caster.
 #26019* [Four of them are included in the SE250/260 Hardware Repair kit, 80-6291-66]Acetal rivets

NOTE: These are the white pins that hold down the Pt wire in the UBC. They are also used in the Blot Module of the miniVE.

 80-6148-59, SE255*

소모품_FAQ_list_5

 1Lower buffer chamber (LBC)

Lower buffer chamber (LBC), for the SE 250 mini vertical electrophoresis unit.

 80-6148-78, SE255D*

소모품_FAQ_list_6

 1For SE260

Deep lower buffer chamber (LBC), for the SE 260 mini vertical electrophoresis unit. This LBC can also convert an existing SE 250 unit into a SE 260, enabling the user to run a wider variety of precast gels.

 80-6149-16, SE256*

소모품_FAQ_list_7

 1 lid assembly.
Includes black and red high voltage leads.
Lid ass’y with cables, Lid assembly with cables, for the SE 250 or SE 260 mini vertical electrophoresis unit.
 80-6177-09, SE6056-HV*

소모품_FAQ_list_8

 1 red and 1 black high voltage leadsHigh voltage safety lead set; High voltage lead set, black and red. Female end is for use with Hoefer safety lids only. Male end is sheathed and may therefore require an adaptor to fit into certain 3rd-party power supplies.
 80-6147-83, SE252*

소모품_FAQ_list_9

 4/pkSpring clamps, red, asymmetric 

Replacement long red springclamps (4 per pack), current design, for the SE 250 or SE 260 mini vertical electrophoresis unit. These clamps have asymmetric claws, which exert a better clamping pressure on the exposed glass face.
These clamps are also used to clamp the face plate to the caster body of the SE 215, SE 235, SE 275 and discontinued  SE 295 multiple gel casters. In the SE 245 dual gel caster, these clamps are used to hold the top edges of 10 x 10.5 cm or 10 x 12 cm glass plates that extend beyond the casting clamps.

 80-6148-02, SE253* 4/pkShort red clamps;
Short red springclamps (4), old design, for the SE 250 or SE 260 mini vertical electrophoresis unit. These clamps are the original design, with symmetric claws so the exposed glass face doesn’t get as much clamping as with the current asymmetric design (SE252). These clamps are also very tight when using spacers of 1.5 mm thickness or more.These clamps are also currently used in the SE 615 and SE 675 multiple gel casters
 80-6148-21, SE253W* 4/pkShort white clamps
 80-6142-13, SE212* 2/pkDecal, well-locating;
Well-locating decals (2 per pack), for the SE 250 or SE 260 mini vertical electrophoresis unit, or for the discontinued Tall Mighty Small SE 280 mini vertical electrophoresis unit.
These are small acetate sheets printed with teeth tracings of standard Hoefer combs. Placing these against the glass plate sandwich allows you to visualize the gel wells for easy sample loading. Reusable.
 80-6421-43 1/4 oz tubeGel seal
 Glass plates, combs and spacers are listed separately in
 80-6114-96, QF-1/4* 2/pkQuickFit connectors, female 1/4″
 80-6115-15, QFX-3/8* 2/pkQuickFit connectors, male 3/8″
 80-6291-66 1 kitRepair kit, SE250/260 Hardware. Includes: banana plugs (2), washers (6), nuts (2), PTFE tubing (three 3″ lengths), acetal rivets (4)

 

SPACERS

 

 Thickness (mm) Length (cm) Color QuantityCode number 
 0.75 8 grey 2/pk 80-6137-95, SE2119T-2-.75*
 1.00 8 white 2/pk 80-6138-14, SE2119T-2-1.0*
 1.50 8 grey 2/pk 80-6138-33, SE2119T-2-1.5*
 0.75 10.5 grey 2/pk 80-6149-92, SE2619T-2-.75*
 1.00 10.5 white 2/pk 80-6150-11, SE2619T-2-1.0*
 1.50 10.5 grey 2/pk 80-6150-30, SE2619T-2-1.5*
 0.75 12 grey 2/pk 80-6152-20, SE2819T-2-.75*
 1.00 12 ? 2/pk 80-6152-39, SE2819T-2-1.0*
 1.50 12 grey 2/pk 80-6152-58, SE2819T-2-1.5*

 

 

COMBS

Comb heights are 13 mm.   ;

 Number of wells Comb thickness (mm) Well width (mm) Well volume (µl per 1 mm depth) Quantity Code number
5 0.75 13.0 9.8 1 80-6140-23, SE211A-5-.75*
5 1.00 13.0 13.0 1 80-6140-42, SE211A-5-1.0*
5 1.50 13.0 19.5 1 80-6140-61, SE211A-5-1.5*
9† 1.00 5.8 5.8 1 1.00 5.8 5.8 1 80-6140-80, SE211A-9-1.0*
 10 0.75 4.8 3.6 1 80-6138-71, SE211A-10-.75*
 10 1.00 4.8 4.8 1 80-6138-90, SE211A-10-1.0*
 10 1.50 4.8 7.2 1 80-6139-09, SE211A-10-1.5*
 15 0.75 2.9 2.2 1 80-6139-47, SE211A-15-.75*
 15 1.00 2.9 2.9 1 80-6139-66, SE211A-15-1.0*
 15 1.50 2.9 4.4 1 80-6139-85, SE211A-15-1.5*
 18† 1.00 2.9 2.9 1 1.00 2.9 2.9 1 80-6140-04, SE211A-18-1.0*
 blank blank blank blank 1 80-6140-99, SE211A-B-.75*
 blank blank blank blank 1 80-6141-18, SE211A-B-1.0*
 blank blank blank blank 1 80-6141-37, SE211A-B-1.5*
 prep 1/1†† 0.75 68/5 51/3.8 1 0.75 68/5 51/3.8 1 80-6141-56, SE211A-R-.75*
 prep 1/1†† 1.00 68/5 68/5 1 1.00 68/5 68/5 1 80-6141-75, SE211A-R-1.0*
 prep 1/1†† 1.50 68/5 102/7.5 1 1.50 68/5 102/7.5 1 80-6141-94, SE211A-R-1.5*

 

*Old Hoefer part designation
†microtiter spacing
††preparative/reference well

[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”2. TE70 Troubleshooting” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”2TE70 Troubleshooting” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]TE70은 Semi-dry transfer 장비이며, 전체 면적은 14 x 16cm입니다. Gel은 단층으로 2장을 side by side로 올릴 수 있고, Cellophane을 통해 stack을 한 개 더 올릴 수 있습니다.

1. 위치 및 Stack (단층의 경우)

소모품_FAQ_list_10

2. Gel을 위로 한장 더 올릴 경우

소모품_FAQ_list_11

3. Power supply error

ⓐ. Stack을 놓는 아랫판에 buffer의 양이 너무 많은 경우에 connection에 error가 생깁니다.
☞ Buffer는 stack의 가장 윗부분에 한번더 올려주는것으로 충분합니다.
ⓑ. TE70의 Lead선과 power supply의 연결을 확인합니다.

 

4. Transfer가 전혀 안됩니다!
☞ Transfer buffer의 pH확인할 것! 특히 CAPS buffer사용시에는 pH11을 확인하고, 일반 Towbin buffer시에는 pH보정 필요없습니다. (pH8.6)

 

5. Transfer가 불안정합니다!
☞ Gel의 개수만큼 current계산을 확인할 것! 0.8mA/cm2 X Gel수를 체크하여 봅니다.

[/ultimate_modal][ultimate_modal modal_title=”3. Ficoll-Paque PREMIUM은 Ficoll-Paque PLUS와 어떤 차이가 있나요?” modal_on=”text” modal_on_align=”left” read_text=”3Ficoll-Paque PREMIUM은 Ficoll-Paque PLUS와 어떤 차이가 있나요?” txt_color=”#555555″ modal_style=”overlay-fade” overlay_bg_color=”” el_class=”popup_up” src=”“/wp-content/uploads/2016/07/popup_list_arrow.png“/”]Answer

Ficoll-Paque PREMIUM 세 가지 제품들은 30 년 전통의 Ficoll-Paque PLUS를 기본으로 해서 생산한 제품으로, chemical composition과 packaging에는 차이가 없습니다.
차이점은 Ficoll-Paque PREMIUM 제품들은 의료 산업 분야의 품질 경영 인증 (QMS ; Quality Management System)인 ISO 13485:2003과 GMP 가이드라인에 따라서 엄격한 제조 공정으로 생산하였다는 점입니다.
따라서, Ficoll-Paque PLUS은 연구용으로만 사용해야 하는 반면에 Ficoll-Paque PREMIUM은 연구용 외에도 In vitro Use가 가능합니다.

(1) 비교 Table

Ficoll-Paque PLUSFicoll-Paque PREMIUM
UseFor Research Use OnlyFor In Vitro Use Only
Quality ManufacturingNo QMSUnder Quality Management System certified to ISO 13485:2003
RSF (Regulatory Support File)NoYes
Max. Density① 1.078 g/ml (human blood; 17-1440-02 & 17-1440-03)① 1.078 g/ml (human blood; 17-5442-02 & 17-5442-03)
② 1.085 g/ml (rat & mice; 17-5446-02)
③ 1.073 g/ml (human bone marrow; 17-5446-52)
ApplicationIsolation of lymphocytes from human peripheral bloodOptimized for the isolation of mononuclear cells from human peripheral blood, bone marrow, and umbilical cord blood
Endotoxin Activity Max.< 0.12 EU/ml
ColorColorless to slightly yellow
Shelf life3 years
pH range5.5 – 7.5
Certificate of AnalysisYes

 

(2) Web Link

① Ficoll-Paque PREMIUM : http://www.gelifesciences.com/webapp/wcs/stores/servlet/productById/en/GELifeSciences-kr/17544202

② Ficoll-Paque PLUS : http://www.gelifesciences.com/webapp/wcs/stores/servlet/productById/en/GELifeSciences-kr/17144003

 

(3) Ordering information

ProductPack sizeCode No.
Ficoll-Paque PREMIUM6 × 100 ml17-5442-02
Ficoll-Paque PREMIUM6 × 500 ml17-5442-03
Ficoll-Paque PREMIUM 1.0846 × 100 ml17-5446-02
Ficoll-Paque PREMIUM 1.0736 × 100 ml17-5446-52
Ficoll-Paque PLUS6 × 100 ml17-1440-02
Ficoll-Paque PLUS6 × 500 ml17-1440-03

[/ultimate_modal][/vc_column][/vc_row]

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