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Chromatography 관련 자주 묻는 질문과 그에 대한 답을 확인해보세요.

  • 크로마토그래피 미디아 (레진)에서 Compression Factor는 무엇인가요?
    레진중에서도 탄성을 가지고 있는 경우, 유속이나 용액의 점도에 따라 컬럼 내부에 걸리는 압력이 달라질 수 있습니다. 이러한 경우, 걸리는 압력에 따라서 레진이 압축되었다가 압력이 풀리게 되면 원래의 상태로 돌아오기 때문에 충진된 레진의 높이가 유속이나 조건에 따라 달라질 수 있고 클리닝을 위해 Reverse flow로 흘리게 되는 경우 충진된 베드가 움직이면서 내부의 팩킹 상태가 변화할 수 있게 됩니다. 그렇기 때문에 초반에 사용조건보다 높은 압력 또는 최대 팩킹압력 등을 적용하여 적절한 압축도를 가지고 팩킹을 진행하게 되는 경우에는 이러한 부분의 문제를 감소시킬 수 있게 됩니다. Compression factor는 중력으로만 가라앉은 것 대비 실제로 팩킹되어야 하는 비율을 이야기 한 것으로 아래의 식에 대입됩니다.

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    일반적으로 가장 많이 사용되시는 sepharose 계열의 레진의 경우는 1.15의 Compression factor 값을 가지게 되며 팩킹시에는 슬러리 농도와 compression factor를 모두 고려한 양을 준비해주셔야 합니다.

    예를 들어 XK16/20에 10cm 정도로 Q sepharose fastflow 레진을 팩킹할 경우, 50%의 슬러리 (전체 슬러리 중 레진이 50%의 부피를 차지)의 경우에는 실제 컬럼부피를 슬러리 농도로 나누어준 다음, 압축되어야 할 compression factor 만큼이 더 필요한 것입니다.

    즉, 컬럼부피 = 단면적 (2㎠) * 높이 (10cm) = 10c㎤ = 10ml

    필요한 레진양 = 컬럼부피 (10ml) * Compression factor (1.15) = 11.5 ml

    필요한 슬러리양 = 필요한 레진양 (11.5ml) / 슬러리 농도 (0.5) = 23 ml 로

    실제로 필요한 레진양은 11.5ml로서 50%의 슬러리 23ml가 실제 팩킹을 위해 필요합니다.
  • 컬럼을 팩킹했는데, 제대로 팩킹한 것인지, 또는 오래동안 보관했던 컬럼을 사용해도 되는 것인지 어떻게 하면 알 수 있나요?
    컬럼팩킹을 한 뒤에나 오래도록 보관되었던 컬럼은 제대로 팩킹이 되었거나 유지되어 있는지에 대해 살펴볼 필요가 있으며, 일반적으로는 흡광도나 전도도의 변화를 가지고 이론단수나 비대칭성을 통해서 컬럼의 효율성을 평가하게 됩니다.

    추가적으로 오래도록 보관이 되어있던 경우에는 보관 전 클리닝 되었던 상태에 따라서 오염이 되는 경우가 있으므로 사용하기 전에 깨끗하게 클리닝을 한 뒤에 사용을 하시는 것이 좋고, 장기 보관시에도 주기적으로 보관용액을 갈아주시는 것이 좋습니다.
  • 컬럼 팩킹에 대해서 알려주세요.
    컬럼은 기본적으로 충진되는 크로마토그래픽 미디아 (레진)의 특성에 따라서 제대로 된 성능이나 장기적인 사용을 위해 적절하게 팩킹이 되어야 합니다. 그렇기 때문에 컬럼팩킹은 사용되는 레진과 컬럼의 타입에 따라서 팩킹방법이 적절히 선택이 되어야 하며, 기본적으로는 Flow/pressure 방법을 사용하여 빈 컬럼의 튜브내부에 적절한 농도의 레진슬러리를 부어준 뒤에 상단 아답터를 통해 팩킹용액을 일정유속, 또는 일정압력을 주어 팩킹을 진행하게 됩니다.

    팩킹이 제대로 진행이 되어야 하는 이유는 컬럼의 타입이나 레진의 특성 또는 사용될 조건을 고려하지 않은 채 팩킹이 되면, 분리효능자체에도 문제가 생길 수 있으며, 사용하면서 컬럼 내부 상태가 변하거나 레진이 변성될 수 있기 때문입니다.
  • [크로마토그래피 용 액세서리] Superloop (슈퍼 루프)의 보관 방법에 대해 가르쳐주세요.
    Superloop는 납품시에는 임시 조립 한 상태로 팩킹되어 있습니다.
    사용 후에는 물 등으로 세척하고 분해하여 건조시킨 상태로 보관합니다.
    또한, 유리관 세척 브러시를 사용하지 마십시오.
    상처가 들어간 경우 유리관의 강도가 저하 될 수 있습니다.

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