멀티 모달 크로마토그래피(MM, Multi-Modal Chromatography)란
멀티 모달 크로마토그래피는 단백질분리를 위해 고정상과 표적 단백질 사이에 하나 이상의 상호작용을 하는 크로마토그래피 방법을 말합니다. 다른 크로마토그래피 방법으로 어려운 생체 물질 분리, 공정 개발 및 생물 처리에 성공적으로 사용할 수 있습니다. 표적 단백질이 가지는 다양한 특성(크기, 표면 전하, 소수성, 특이적 상호작용 등)을 사용하여 선택성을 높일 수 있습니다.
멀티 모달 크로마토그래피 원리
결합/용리 또는 통과 단계에서 멀티 모달 크로마토그래피를 수행할 수 있습니다.
결합/용리에서 표적 분자는 혼합 모드 상호작용을 통해 수지에 결합된 리간드에 결합합니다. 완충액 조성 및 pH의 변화는 수지에서 분자를 방출하여 수집을 허용합니다(분자는 완충액으로 “용출”됨)
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- 평형(Equilibration): 원하는 시작 조건으로 컬럼을 준비합니다. 평형에 도달하면 고정상의 모든 전하 그룹은 염화물 또는 나트륨 이온과 같은 교환 가능한 반대 이온과 연결됩니다.
- 샘플 애플리케이션 및 세척(Sample application and wash): 표적 분자는 멀티 모달 상호작용을 통해 수지의 리간드에 결합합니다.
- 용출(Elution): 표적 분자는 완충액 조성과 완충액 pH를 변화시켜 고정상에서 방출됩니다.
- 재생(Regeneration): 고정상에 여전히 묶여 있는 모든 분자를 제거합니다. 다음 실행 시 사용할 수 있도록 레진 전체 용량을 보장합니다. 1M NaOH는 종종 레진을 세척하는 데 사용됩니다.
멀티 모달 레진 종류
싸이티바(Cytiva)는 단백질 정제 연구, 공정 개발, 제조에 이르기까지 목적에 따른 다양한 형태의 혼합 방식(멀티 모달) 크로마토그래피 레진을 제공합니다.
주요 레진
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Capto™ adhere: capture and polishing 단일클론항체(mAb) 폴리싱용 레진. Protein A 정제 공정 후 불순물을 정제 레벨까지 감소. 용출 모드에서 높은 불순물 제거 효과.
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Capto™ MMC ImpRes: polishing 제조 스케일의 폴리싱 정제용으로 개발된 레진. 강성 아가로스를 사용하여 입자 크기를 제어하여 분리 능력은 유지하면서 압력 유속 특성 개선.
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Capto™ MMC: capture 고도로 cross-link된 아가로스 레진에 이온 교환성뿐 아니라 소수성 상호작용, 수소 결합 등 멀티 선택성을 가진 리간드 결합. 고염 농도 조건에서 높은 흡착 성능 유지.
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Capto™ Core 400: vaccine applications 바이러스 및 고분자량 분자의 중간 정제 및 최정 정제용 레진. 높은 샘플 부하와 상당히 높은 유량으로 인해 생산성이 크게 향상.
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Capto™ Core 700: vaccine applications 바이러스 및 고분자량 분자의 중간 정제 및 최정 정제용 레진. 겔 여과 크로마토그래피에 비해 고분자 폴리싱 처리 능력 대폭 개선.